LFB髓鞘染色簡(jiǎn)介： 

勞克堅(jiān)牢藍(lán)(LFB)屬于銅－酞箐染料，在酒精溶液中具有與髓鞘磷脂結(jié)合的染色特性。應(yīng)用LFB髓鞘染色可以很好地顯示出神 經(jīng)組織的髓鞘結(jié)構(gòu)。 

LFB髓鞘染色實(shí)驗(yàn)意義： 

LFB染色觀察染色陽性纖維的深淺和多少，還可用來定量分析脫髓鞘病變及髓鞘再生等有關(guān)髓鞘改變情況。 

實(shí)驗(yàn)步驟： 

（1）石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。 

（2）染色：切片置于0.1% LFB染液60℃孵育過夜，自來水沖洗。 

（3）分化：切片放入70%乙醇中（無固定時(shí)間）；切片浸入0.05% 碳酸鋰中，鏡下控制分色時(shí)間至分色完全（可見灰質(zhì)部分 顏色變淡）；如分化不好這兩步交替進(jìn)行幾次至鏡檢滿意，水洗。 

（4）伊紅復(fù)染：0.1%伊紅復(fù)染1min，水洗。 

（5）封片：電吹風(fēng)吹干或烘箱吹干；二甲苯透明數(shù)分鐘，中性樹膠封片。 

（6）顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 經(jīng)髓鞘呈藍(lán)色；其他成分呈紅色。 

實(shí)驗(yàn)技巧： 

（1）切片若為石蠟切片，要在二甲苯中先脫蠟，再至無水乙醇。 

（2）0.05%碳酸鋰水溶液分色應(yīng)該在顯微鏡下進(jìn)行，至背景呈灰色為止。70%酒精再次分色時(shí)，至背景無色為止。 

（3） LFB染色完后，可用焦油紫溶液或蘇木素－伊紅復(fù)染，這樣能更好地顯示出細(xì)胞的形態(tài)。 

（4） 復(fù)染之后要入正丁醇漂洗脫水，這樣染色效果更佳。

（5） 溶液配制：勞克堅(jiān)牢藍(lán)1g，95%酒精100ml，10%冰.醋.酸0.5ml。混勻后過濾，室溫保存。

LFB髓鞘染色樣片參考

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