大鼠腺嘌呤模型飼料誘導(dǎo)腎功能衰竭(腎衰)和造模方法 Model Diet and Protocol of Renal Failure in Rats
應(yīng)用含高含量腺嘌呤的模型飼料誘導(dǎo)大鼠腎功能衰竭方法有如下優(yōu)點(diǎn)：
(1) 大鼠能夠忍受高含量腺嘌呤模型飼料。
(2) 大鼠對腺嘌呤的味道能夠忍受。（相比較而言，小鼠厭惡腺嘌呤）
(3) 在喂大鼠腺嘌呤模型飼料后，可以模擬出人類慢性腎臟疾病的大多數(shù)表現(xiàn)，包括血清肌酐升高，蛋白尿，間質(zhì)纖維化， 腎小管和腎小球損傷。
(4) 大鼠不同品系建立的模型基本一致，例如，SD大鼠、Witar大鼠的模型表現(xiàn)基本相同。
(5) 腎臟損傷速度快，喂養(yǎng)幾周后可表現(xiàn)腎臟功能的明顯改變。 因此，大鼠喂腺嘌呤模型飼料是當(dāng)前廣為采用的誘導(dǎo)慢性腎臟疾病（CRF）的動(dòng)物模型。
模型方法一：大鼠喂0.75%腺嘌呤模型飼料
在以往大量文獻(xiàn)中采用了這種方法。屬于經(jīng)典法。
【模型飼料】含0.75%腺嘌呤
【模型方法】大鼠自由飲食。
【模型表現(xiàn)】體重明顯下降，血壓(收縮壓)升高，間質(zhì)纖維化，腎小管擴(kuò)張、萎縮，腎小球異常，血漿尿酸、尿素氮、肌酐 濃度升高，尿蛋白增加（蛋白尿），血漿鉀升高，血漿鈣、鈉正常。
【模型缺點(diǎn)】大鼠在喂養(yǎng)后體重下降幅度較大，營養(yǎng)不良明顯，有較高的死亡率。
模型方法二：大鼠喂0.25%腺嘌呤模型飼料 0.75%腺嘌呤含量的模型飼料引起的慢性腎衰表現(xiàn)比較嚴(yán)重，因此，該方法根據(jù)腺嘌呤的劑量-效應(yīng)關(guān)系而優(yōu)選出的腺嘌呤 合適含量的模型飼料進(jìn)行造模。
【模型飼料】含0.25%腺嘌呤，飼料代碼：TP 1S006或TP 1S007
【模型方法】大鼠自由飲食。
【模型表現(xiàn)】體重增加，與0.75%腺嘌呤模型飼料誘導(dǎo)的慢性腎衰表現(xiàn)相同，但大多數(shù)指標(biāo)的變化程度較輕。
【模型缺點(diǎn)】造模時(shí)間相對較長。
造模注意事項(xiàng)
(1) 由于慢性腎衰時(shí)出現(xiàn)鈣、磷代謝改變和血清鈣濃度、磷濃度和維生素D濃度改變（低鈣血癥和高磷血癥），需要對模型 飼料中鈣、磷和維生素D等等營養(yǎng)素的水平提出了特別要求，因此，上述模型飼料根據(jù)模型造模需要進(jìn)行了合理調(diào)整。
(2) 根據(jù)需要建立的慢性腎臟疾病的進(jìn)展速度和嚴(yán)重性以及研究的實(shí)際需要選擇上述模型方法。
大鼠腎切除（5/6）模型
造模機(jī)制 大鼠5/6腎切除(nephrectomy, NT)后殘存腎單位出現(xiàn)高灌注、高濾過和高壓力，進(jìn)而導(dǎo)致腎小球硬化和殘余腎單位的進(jìn)一步 破壞，出現(xiàn)以腎小球肥大、硬化等為主要特點(diǎn)的慢性腎衰竭的腎間質(zhì)纖維化病變。
實(shí)驗(yàn)方法
1．選用90只體重S(200±20)g雄性Wistar大鼠。
2．模型制備采用二期法 速眠新Ⅱ號1ml/kg肌內(nèi)注射麻醉，選取背部左側(cè)切口，暴露左腎，剝離腎包膜，將腎的上下級各1/3 切除，明膠海綿壓迫切面止血。一期手術(shù)后7天，行二期手術(shù)，同樣方法麻醉，右側(cè)背部切開暴露右腎，結(jié)扎腎蒂，摘除右 腎。假手術(shù)組與5/6 NT組動(dòng)物同時(shí)進(jìn)行二次手術(shù)，但僅剝離腎包膜暴露腎臟后關(guān)腹。5/6 NT組于二期手術(shù)后30、60、90天 時(shí)，每組隨機(jī)選取15、15、18只大鼠處死，進(jìn)行分析。
3．樣本采集和指標(biāo)測定 麻醉下心臟采血，血液收集后經(jīng)離心分離出血清，尿液和血清均保存于-20℃冰箱。取左腎組織稱 重，用4％多.聚.甲.醛固定，石蠟包埋。檢測24小時(shí)尿蛋白、血清Cr及 BUN。腎組織做病理分析。
模型特點(diǎn)
5/6腎切除后，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生，腎小球硬化，腎小管灶狀萎縮，間質(zhì)纖維化，表現(xiàn)出與人類腎臟纖維化相一致的 病理過程。5/6腎切除組24小時(shí)尿蛋白量、血BUN、血Cr水平明顯升高。殘腎的腎重/體重逐漸增加，到術(shù)后90天幾乎接近假 手術(shù)組大鼠左腎腎重，體重。5/6腎切除后殘腎腎小球面積和腎小球毛細(xì)血管體積增加，腎小球硬化指數(shù)及腎小管間質(zhì)損傷 評分明顯高于假手術(shù)組。免疫組化結(jié)果顯示5/6腎切除組腎間質(zhì)和小管上皮細(xì)胞α-平滑肌動(dòng)蛋表達(dá)增加。
需確認(rèn)的信息
1. 模型種屬（大鼠還是小鼠或是其他種屬）
2. 動(dòng)物體重有無要求，年齡有無要求
3. 雌雄有無要求
4. 模型構(gòu)建具體方案
5. 取材要求（采血、取組織樣本）
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