染色機(jī)制:
間苯二酚堿性品紅與鐵形成一種很深的色淀復(fù)合物,其游離的氨基與彈性纖維內(nèi)的氫鍵牢固結(jié)合呈紫藍(lán)色。該顏色不易脫 色,并能很好保存。
染色應(yīng)用:
彈力纖維廣泛分布于身體各處,特別在動(dòng)脈壁、肺泡壁和皮膚最為豐富。此法可以清楚地將組織內(nèi)細(xì)小的彈力纖維顯示出 來。彈力纖維染色可以顯示皮膚組織中彈力纖維的變化,如彈力纖維痣、皮膚環(huán)狀肉芽腫、硬度病等;顯示不判定心內(nèi)膜及 動(dòng)脈的病變,觀察某些病變中是擊伴有彈力纖維的增生或破壞;還可鑒別腫瘤組織成分如彈力纖維瘤,經(jīng)彈力纖維染色后, 可清晰見到瘤體內(nèi)彈力纖維球。
實(shí)驗(yàn)步驟 :
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min, 自來水洗。
2、氧化:酸化高孟酸鉀(高孟酸鉀:硫酸=1:1混合)氧化5min,自來水洗。
3、漂白:草酸溶液漂白1-2min,至無色,流水沖洗2min,95%的乙醇稍浸洗。
4、間苯二酚堿性品紅染色:切片入間苯二酚品紅染液中浸染并加蓋,室溫下3~4h,流水沖洗。
5、背景分化:鹽酸酒精分化至無染液脫下,彈力纖維清晰的紫紅色,背景淡紫或近乎無色。
6、復(fù)染VG:將飽和kuweisuan與酸性品紅9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,無水乙醇三缸快速脫水。
7、透明封片:干凈的二甲苯透明1-5min,中性樹膠封片。
8、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。 染色判讀: 彈力纖維紫紅色,膠原纖維紅色,背景其他成分黃色。
注意事項(xiàng):
VG復(fù)染過程中水洗要快,防止紅色褪掉,無水乙醇也要快洗,防止黃色變暗。
染色結(jié)果:
彈力纖維呈紫色,膠原纖維呈紅色,背景其他成分呈黃色。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
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