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          裸鼠肝原位瘤藥效評估

                 先用組織學完整的新鮮人肝癌組織接種于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤,然后用此移植瘤組織再接種于裸鼠肝內,建立肝原位移植瘤模型(間接肝原位移植瘤模型),并將其與直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔內移植瘤模型作比較。 


          一、間接肝原位移植瘤模型的制備  

          1. 用新鮮的肝癌外科手術切除標本(來自長海醫院,患者為1名47歲男性,病理診斷:肝左葉肝細胞癌,粗梁型,Ⅱ 級),在Hanks液中,去除壞死組織和非癌組織后切成1~2 mm3小塊。

          2. 取2塊瘤組織,在離體40 min內用粗針頭植入裸鼠腰背部皮下,待皮下移植瘤長到直徑約1 cm時切取腫瘤,在Hanks 液中,去除壞死組織后切成1~2 mm3小塊,裸鼠用戊巴bi妥鈉腹腔麻醉后,行左上腹橫切口,暴露肝臟。

          3. 取上述2塊瘤組織,在離體40 min內用粗針頭植入裸鼠肝右葉深部實質內,全層關腹。


          二、直接肝原位移植瘤模型的制備  

          1. 同一例新鮮肝癌手術切除標本,處理方法同皮下移植,裸鼠處理同間接肝原位移植,取2塊瘤組織,在離體40 min內 用粗針頭直接植入裸鼠肝右葉深部實質內。

          2. 皮下移植瘤模型和腹腔內移植瘤模型的制備。

          三、病理檢查和相關指標檢測 

          1. 解剖和組織學檢查

          (1)所有裸鼠接種后,分組分籠飼養,自由進食,每天觀察1~2次。 

          (2)當裸鼠處于全身衰竭狀態時處死并作大體解剖,對接種瘤和轉移瘤分別進行觀察、測量,記錄腫瘤侵襲和轉移 情況,重要器官(主要為肝和肺)經10%中性甲醛固定后,常規石蠟制片,光學顯微鏡檢查。 



          2. 周圍血甲胎蛋白(AFP)檢測

          處死前,均采用摘眼球采血的方法獲得血液,用生化法檢測AFP的分泌量。 

          3. 瘤細胞DNA含量分析

          留取部分移植瘤標本采用流式細胞術進行DNA含量分析。



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