實(shí)驗(yàn)原理 

活性氧檢測(cè)（Reactive Oxygen Species Assay Kit）是一種基于熒光染料DCFH-DA（2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate）的熒光強(qiáng)度變化，定量檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的最常用方法。 

DCFH-DA本身沒(méi)有熒光，可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜。進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不會(huì)通透細(xì)胞膜，因此探針很容易被積聚在細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧能夠氧化無(wú)熒光的DCFH生成有熒光的DCF。綠色熒光強(qiáng)度與活性氧的水平成正比。在最大激發(fā)波長(zhǎng)480 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)525 nm處，使用熒光顯微鏡，流式細(xì)胞儀或激光共聚焦顯微鏡等檢測(cè)熒光信號(hào)。Rosup為活性氧陽(yáng)性誘導(dǎo)藥物，根據(jù)其熒光信號(hào)強(qiáng)度，可分析活性氧的真正水平。 

檢測(cè)方法 

原位裝載探針?lè)ǎ杭す夤簿劢癸@微鏡直接觀察，或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 收集細(xì)胞后裝載探針：用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。 

注意事項(xiàng) 

1、探針裝載后，一定要洗凈殘余的未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針，否則會(huì)導(dǎo)致背景較高。 

2、探針裝載完畢并洗凈殘余探針后，可以進(jìn)行激發(fā)波長(zhǎng)的掃描和發(fā)射波長(zhǎng)的掃描，以確認(rèn)探針的裝載情況是否良好。 

3、盡量縮短探針裝載后到測(cè)定所用的時(shí)間（刺激時(shí)間除外），以減少各種可能的誤差。 

4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果： 

歡迎咨詢(xún)?cè)斦劊覀儠?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。 

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