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          蛋白雙向電泳

          實驗技術(shù)簡介: 

                 雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合,即先進行等電聚焦電 泳(按照pI分離),然后再進行SDS-PAGE(按照分子大小),經(jīng)染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質(zhì)圖。 

          實驗原理: 

                 雙向電泳是目前為止最有效、使用最多的蛋白分離方法。差異蛋白質(zhì)組學是在雙向電泳后用考麻斯亮藍、 銀離子或熒光染料等將蛋白斑點染色,然后比較差異。本公司在各類微生物、培養(yǎng)細胞、動植物組織(如 動物軟硬組織、體液、植物種子、葉子等)、亞細胞組分的雙向電泳分離及后續(xù)質(zhì)譜鑒定中均有豐富的經(jīng)驗。 

          蛋白質(zhì)組學雙向電泳技術(shù)服務(wù)項目: 

          1.根據(jù)客戶需求定制蛋白質(zhì)組學實驗方案 

          2.各種規(guī)格膠條長度的雙向電泳 

          3.考麻斯亮藍染色、銀離子染色

          4.DIGE系統(tǒng)雙向電泳

          5.圖像分析 

          6.切膠質(zhì)譜分析 

          服務(wù)說明: 

          1.我們的實驗只對我們制作的樣本負責,如您提供的是直接做等點聚焦的樣本,我們不敢保證蛋白的有效分離。 

          2.蛋白質(zhì)組學實驗的總體實驗流程。

          實驗流程: 

          1、樣本制備 

          2、固相預制膠條水化 

          3、第一向等電聚焦(IEF) 

          4、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳 

          5、凝膠染色檢測 

          6、圖片掃描雙向電泳服務(wù)結(jié)果提交 

          1、實驗的試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過程一份

          2、實驗結(jié)果凝膠掃描圖片

          3、電泳凝膠(可收費干膠)

          4、剩余樣本

          說明: 

          1.樣品制備指可用通常程序處理的原樣,如樣品較特殊(需要去除核酸、鹽等雜質(zhì)或需要濃縮),價格將 視進一步處理的難度和耗材用量另行商定; 

          2.建議客戶提供的原樣(組織、細胞、菌體等)濕重不少于100mg,如直接提供蛋白提取物,則濃度不少 于4ug/ul,總量不少于5mg; 

          3.樣品的還原和烷基化過程一般在制備時進行; 

          4.圖象處理與切膠主要是手工操作成本。 

          5.客戶方需提供: 細胞,組織或蛋白。 

          實驗周期: 5-10天

          可提供技術(shù)支持: 

          1、從現(xiàn)有的生物有機體基因組中,經(jīng)過酶切消化或PCR擴增等方法,獲得帶有目的基因的DNA片段。 

          2、在體外,將帶有目的基因的外源DNA片段連接到具有選擇標記的載體分子上,形成能夠自主復制的重 組DNA分子。 

          3、將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適宜的受體細胞,并使其一起增殖。 

          4、從大量的細胞繁殖群體中,篩選出獲得了重組DNA分子的受體細胞克隆。 

          5、由篩選出來的受體細胞克隆,提取出已經(jīng)得到擴增的目的基因,供進一步分析研究使用。 

          6、將分離到的目的基因克隆到表達載體上,導入受體細胞,使之在新的遺傳背景下實現(xiàn)功能表達,產(chǎn)生出人類所需要的物質(zhì)。


          收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果: 

          歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。 

          更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電咨詢! 


          做實驗,找碩璽!您的科研生涯,我們一路相伴! 

          【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動 物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計指導、基金申請指導、SCI、核 心期刊等服務(wù)。 

          【碩璽生物】已開展了數(shù)千個實驗外包項目。我們專注于醫(yī)學課題研究,已從課題申請、方案設(shè)計、試劑 采購、模型構(gòu)造、標本檢測、數(shù)據(jù)分析、以及對SCI撰寫與發(fā)表的支持,各個環(huán)節(jié)積累了數(shù)千個成功案例 經(jīng)驗,為數(shù)千個來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關(guān)實驗服務(wù)信息請咨詢碩璽生物。

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